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實時熒光定量PCR實驗待測服務(wù)

信帆生物提供 RT-PCR檢測，實時熒光定量PCR實驗檢測測，RT-PCR代測?？蛻糁恍枰峁颖?，其他所有試劑都由本公司提供。一般7-10天出結(jié)果，提供原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)，實驗報告，實驗室所用儀器型號，圖片，動力擴增曲線等。

Real -Time PCR，即實時監(jiān)測PCR擴增產(chǎn)物并進行解析的方法，它是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì)，并通過Real -Time PCR檢測系統(tǒng)對PCR反應(yīng)進程中的熒光信號強度進行實時監(jiān)測，終對實驗數(shù)據(jù)進行分析處理的方法。Real -Time PCR自1996年由美國Applied Biosystems公司推出以來，廣泛應(yīng)用于生物研究的各個領(lǐng)域。目前主要有SYBR Green 染料、Taqman探針法兩種。
 
服務(wù)內(nèi)容
    通過用SYBR熒光染料法 或者TaqMan熒光探針法，我們能為客戶提供實時熒光定量PCR全套技術(shù)服務(wù)。同時我們將提供給客戶完整的實驗資料和分析步驟，客戶只需提供標(biāo)本和標(biāo)本的基本信息。

技術(shù)優(yōu)勢

1. 使用進口穩(wěn)定的定量PCR儀

2. 核心試劑采用原裝試劑，實驗結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好。
3. 豐富的qPCR經(jīng)驗，基因類別有DNA、mRNA、miRNA等；物種類別有人、鼠、雞、牧草、酵母菌、金黃色葡萄菌等。

客戶須知：

1. 客戶須在實驗開始前確保其提供材料的數(shù)量和質(zhì)量，并提供相關(guān)信息，客戶應(yīng)當(dāng)清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定；
2. 盡可能新鮮和足量的組織（50-100mg）、細胞樣品（10⁶）或血清，或直接提供純化好的總RNA（≥0.5μg/樣品）；
3. 所需要檢測mRNA注冊號和名稱；

服務(wù)承諾：

1. 我方對實驗結(jié)果以及客戶所提供的資料保密，未經(jīng)客戶許可，我方不得將客戶的實驗內(nèi)容、實驗結(jié)果和相關(guān)信息對外公布。
2. 本公司將在收到客戶樣本后并簽訂合同的第二個工作日起開始檢測工作。
3. 提供給客戶原始實驗數(shù)據(jù)以及詳細的實驗流程及報告。

RT-PCR實驗流程：

1.實驗用品準(zhǔn)備；

2.樣本總RNA提取；

3.RNA濃度檢測；

4.反轉(zhuǎn)錄；

5.數(shù)據(jù)分析及結(jié)論。

 
PCR實驗中注意事項：
1)所用的所有溶液都應(yīng)該沒有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。
2)所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的-新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過濾的，并且是高壓滅菌。
3)在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應(yīng)。
4)所用試劑都應(yīng)該以大體積配制，實驗一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。
5)所有試劑和樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。
6)新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗。
7)樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時都應(yīng)該小心保存。

 

熒光定量 PCR 中的一些術(shù)語
CT值：熒光信號有統(tǒng)計意義顯著增長(即穿過閾值線)時的循環(huán)次數(shù)，或者說是從基線到指數(shù)增長的拐點所對應(yīng)的循環(huán)次數(shù)。
閾值：閾值的默認(rèn)設(shè)置是 3-15 個循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的 10 倍。
CT值與起始模板的量成線性關(guān)系。

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